Al 18 de Junio de 2011 se reportaron en Alemania 3222 casos pertenecientes al brote de Escherichia coli (incluyendo 39 fallecimientos), de los cuales 810 (25%) presentaron Sindrome Urémico Hemolítico (SHU).

En los EEUU al 22 de Junio se han confirmado 5 casos, un caso sospechoso y un fallecimiento de una persona con viaje reciente a Alemania en quien no se confirmó la presencia de la cepa del brote.

La OMS ha recibido una notificación de 8 pacientes (6 mujeres y 2 hombres) con diarrea sanguinolenta, siete de los cuales desarrollaron SHU, en la región francesa de Burdeos  con edades comprendidas entre 31-78 años.

Los casos de SHU y diarrea con sangre han sido notificados en Alemania, Dinamarca, Gran Bretaña, Francia, Holanda, Noruega, Austria, España, Suecia, Suiza y Estados Unidos. La mayoría de los casos registrados fuera de Alemania tuvieron como vínculo epidemiológico el viaje a ese país.

La mayoría de los pacientes de Alemania fueron adultos (89%) con edad media de 43 años  y  sexo femenino (68%).

La cepa asociada al brote es productora de toxina Shiga (STEC) y corresponde al serotipo O104:H4, toxina Shiga 2 (stx2)-positiva, intimina (eae)-negativa, enterohemolisina (ehxA)-negativa. Presenta factores de virulencia compatibles con E coli enteroagregativa.

La cepa es resistente a los siguientes antibióticos: Ampicilina, Amoxicilina/Äc. clávulánico, Piperacilina/Sulbactam, Piperacilina/Tazobactam, Cefuroxima, Cefuroxima-Axetil, Cefoxitina, Cefotaxima, Ceftacidima, Cefpodoxima, Estreptomicina, Ac. Nalidíxico, Tetraciclina, Trimetoprima/Sulfametoxazol. La cepa además presenta β-lactamasa del tipo TEM-1+.

Definiciones de caso (Según el Ministerio de Salud de la Nación)

Caso de SUH (confirmado): Toda persona con disfunción (fallo o insuficiencia) renal acompañado de uno o más de los siguientes criterios: anemia hemolítica microangiopática y/o trombocitopenia ≤150.000 cel/mm3, y que puede o no comenzar con un episodio de diarrea con o sin sangre en las 3 semanas previas.

Diarrea con sangre: Todo persona con deposiciones aumentadas en número y cantidad con menor consistencia con presencia de sangre visible y que puede incluir la presencia de moco.

Caso sospechoso de STEC O104 epidémico: Todo caso de diarrea con sangre o SUH con antecedentes de viaje a Europa dentro de los 14 días previos al inicio de los síntomas.

Caso confirmado de STEC O104 epidémico: Todo caso sospechoso de STEC O104 epidémico con laboratorio confirmado para STEC O104:H4.

Cuándo se deberá indicar coprocultivo para el estudio de STEC O104?

• Todo caso de diarrea con sangre con antecedentes de viaje a Europa en los últimos 14 días.
• Todo caso de SHU, independientemente del antecedente de viaje.
• Todo caso estudiado por vigilancia regular de Diarreas Bacterianas, con resultados positivos para STEC no-O157.

Existe comercialmente  un kit de ELISA para la detección cualitativa en materia fecal de las Verotoxinas(1 y 2) de Escherichia coli que debería utilizarse ni bien llega la muestra al laboratorio para detectar la presencia de las mismas sin esperar el cultivo. En el Hospital El Cruce contamos con dicha práctica en nuestra cartilla de prestaciones.

La muestra que debería remitirse es materia fecal diarreica, siempre la porción más purulenta y sanguinolenta, preferentemente 2 o 3 porciones en un frasco de cultivo con tapa a rosca o en 2 hisopos materia fecal visible con medio de transporte apropiado.

BIBLIOGRAFÍA

1- Epidemic Profile of Shiga-Toxin-Producing Escherichia coli O104:H4 Outbreak in Germany—Preliminary Report. Christina Frank, Ph.D., Dirk Werber, D.V.M., Jakob P. Cramer, M.D., Mona Askar, M.D., Mirko Faber, M.D., Matthias an der Heiden, Ph.D., Helen Bernard, M.D., Angelika Fruth, Ph.D., Rita Prager, Ph.D., Anke Spode, M.D., Maria Wadl, D.V.M., Alexander Zoufaly, M.D., Sabine Jordan, M.D., Klaus Stark, M.D., Ph.D., and Gérard Krause, M.D., Ph.D. for the HUS Investigation Team

June 22, 2011 (10.1056/NEJMoa1106483)

2- http://www.esicm.org/

3- http://ecdc.europa.eu/en/Pages/home.aspx

4- http://aguasegura.msal.gov.ar/

5-http://www.cdc.ghttp://www.aam.org.ar/ov/ecoli/2011/ecolio104/

6- http://www.msal.gov.ar

6- http://www.who.int/foodsafety/publications/consumer/5keys/en/

7- http://www.anlis.gov.ar/brote-de-stec/EscherichiaAlimentos.pdf

8- http://www.anlis.gov.ar/brote-de-stec/EscherichiaClinica.pdf

9- http://www.aam.org.ar/

ÁREA DE BIOLOGÍA MOLECULAR

INICIO: El laboratorio comienza una nueva etapa con la incorporación de determinaciones de laboratorio por PCR REAL TIME. Debido a la necesidad de un hospital de alta complejidad de métodos diagnósticos más sensibles y específicos las prestaciones de inicio están dirigidas al diagnóstico de infecciones sistémicas y del Sistema Nervioso Central.

Menú Prestacional

• Herpes Virus Simplex (HSV) : La realización de PCR en LCR posee una sensibilidad del 98-100 %. La utilización de este método es primordial para el diagnóstico de formas graves de enfermedad herpética como encefalitis y herpes neonatal.
  
• Citomegalovirus (CMV): es la técnica más ampliamente utilizada en la detección de CMV. Se puede aplicar a una gran variedad de muestras como LCR, líquido amniótico, orina y sangre de neonatos y humor acuosos o vítreos de pacientes VIH con retinitis.
• Virus Varicela Zoster (VZV)
• Virus Epstein Barr
• Virus JC/BK
  
• Toxoplasma gondii
• Mycobacterium tuberculosis. Mycobacterias atípicas.
• Detección del gen mecA  (meticilino-resistencia MRS)
• Detección del  gen vanA y vanB (vancomicina-resistencia VRS)
• Detección de Mycoplasma pneumoniae
  

INFECCIONES RESPIRATORIAS VIRALES AGUDAS

• Diagnóstico de Influenza A H1N1 en muestras respiratorias por PCR real time.

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CITOGENÉTICA CLÍNICA

INDICACIONES:

1. PERÍODO PRENATAL:

- Embarazada mayor de 35 años

- Triple screening alterado

- Retraso de crecimiento intrauterino (CIR)

- Anomalía ecográfica

- Antecedentes de cromosomopatía balanceada en un progenitor

2. PERÍODO NEONATAL:

- Malformaciones/ Defectos congénitos

- Rasgos dismórficos

- Genitales ambiguos

- Muerte neonatal de causa inexplicada

3. PERÍODO LACTANCIA/ESCOLAR:

- Dificultades para el aprendizaje

- Rasgos dismórficos

- Retraso psicomotor

4. PERÍODO DE ADOLESCENCIA:

- Ginecomastia

- Falta de desarrollo puberal

- Amenorrea primaria o secundaria

5. PERÍODO DEL ADULTO:

- Padres de niños con anomalías cromosómicas estructurales

- Abortos de repetición

- Infertilidad inexplicable

6. EN TODAS LAS EDADES:

- Procesos malignos (cariotipo constitucional y tumoral)

- Control de trasplantes de medula ósea

ANOMALÍAS CROMOSÓMICAS

Estructurales

•Inversiones

•Inserciones

•Duplicaciones

•Deleciones

•Cromosomas marcadores

•Anillos

•Isocromosomas

•Translocaciones

Numéricas

•Poliploidías

•Aneuploidía

Se encuentran anomalías cromosómicas en aproximadamente 30 de 10000 nacimientos, mientras que los desórdenes del sistema nervioso (como defectos del tubo neural) se expresan en 20 de 10000 nacimientos •Poliploidías

Diapositiva 6

“IDENTIFICACION Y ORDENAMIENTO SISTEMÁTICO DE LOS CROMOSOMAS DE UNA CÉLULA DE ACUERDO A CONVENCIONES INTERNACIONALES”

Principio

• El cariotipo constitucional de un individuo es determinado en la concepción.

• Las mitosis sucesivas darán lugar a copias del complemento cromosómico en todas las células que posteriormente originarán los distintos tejidos derivados.

• Se incluye tanto al tejido fetal propiamente dicho como a los tejidos extraembrionarios (córion, amnios, saco vitelino, etc.)

Biopsia de Vellosidades Coriales

Area de Microbiología

• Sector Bacteriología
• Sector Parasitología
• Sector Micología
• Sector Virología
• Inmunofluorescencia
• Biología Molecular

Aparatología:Bactec Instrument ( Becton Dickinson Argentina S.R.L.): Automatización de hemocultivos.

Microscopio de Inmunofluorescencia

PCR REAL TIME

Area de Hematología

• Sector Hemostasia

Aparatología:  ELITE PRO  ( WMArgentina SA)

• Sector hematología (contador hematológico)-Metabolismo del

Hierro. Electroforesis de Hemoglobina.

Aparatología: CELL DYN 3700 (ABBOTT Laboratories)

Architect i-1000 (ABBOTT)

AXSYM PLUS ( ABBOTT Laboratories)

BT 3000 PLUS ( WIENER lab

SPIFE 3000  ( BIOARS)

Área de Química Clínica

• Determinaciones en Autoanalizador para Química Clínica: sustratos metabólicos-Enzimología- Perfiles lipídicos- Marcadores cardíacos-Perfil hepático-Función renal.
• Determinaciones turbidimétricas.
• Determinaciones manuales: ASTO-PCR-FR

Aparatología: BT 3000 PLUS (WIENER )

Autoanalizador para química clínica

Area de Serología (Serología 1, 2 y 3)

Serología 1.1

• Pruebas turbidimétricas.

BT 3000 (WIENER)

Serología 1.2

• Endocrinología-Marcadores tumorales-Marcadores de resorción ósea-Marcadores cardíacos.
• Hormonas: Eje Tiroideo-Eje Adrenal-Eje hipofisis-hipotalámico.
• Marcadores de Resorción Osea: Beta crosslaps,osteocalcina, PTH molécula intacta, Vitamina D3)
• Marcadores cardíacos: Troponina T, Mioglobina

ARCHITECT i-1000 (ABBOTT)

AXSYM PLUS (Propiedad de ABBOTT)

Serología 1.3

• Inmunoserología: Marcadores de Hepatitis- VIH- Rubeolla- CMV

FERRITINA-Hormonas-BNP-Drogas terapéuticas)

• Técnicas manuales: Confirmaciones por Western-blot-MHTP

Aparatología: AXSYM PLUS ( ABBOTT)

PCR Real TIME (LIGHT CYCLER 2.0 ROCHE)

Serología 2

• Sector de Proteínas Plasmáticas: Electroforesis- Inmunoelectroforesis-Inmunofijación-Determinaciónh cuantitativa  por nefelometría  de Inmunoglobulinas y demás  l fracciones proteicas.

• Lipidogramas

Aparatología: SPIFE 3000 ( BIOARS)

Serología 3

• Enfermedades autoinmunes- TORCH- Pruebas de Avidez-Enfermedades tropicales ( Chagas, dengue), HTLV I y II- Hidatidosis-Rotavirus-Adenovirus

• Autoinmunidad: ANA- ASMA- AMA- Hepatitis autoinmune-ENA. Técnicas de ELISA  e IF)

Aparatología: BRIO (BIOARS SA)

Microscopio de Inmunofluorescencia

Area de Análisis de Orina-Coprología

ORINAS

• Orina Completa: Examen físico, químico y microscópico
• Pigmentos biliares. Melanuria
• Cetonuria
• Porfirinas en orina
• Hematies dismórficos
• Recuento de Addis

PARASITOLOGÍA

• Examen parasitológico en fresco
• Examen parasitologico seriado
• Parásitos superiores en materia fecal
• Test de Graham
• Cultivo por Harada Mori
• Concentración de Baerman
• Coloración de Tricrómica Wheatley (determinación de trofozoitos)
• Heindenhain (determinación de amebas)
• Spencer Monroe (determinación de D.fragilis)
• Kinyoun (determinación de criptosporidium, isospora y ciclospora)
• Tricromica de Ryan (determinación de microsporidium)
• Calcoflúor White (screenig de microsporidium)

COPROLOGÍA

• Determinación cualitativa de grasas en materia fecal (Saathoff)*
• Esteatocrito
• Estudio químico funcional de materia fecal*
• Leucocitos, sangre, mucus, restos alimenticios en materia fecal
• Prueba de la D- xilosa*
• Sangre oculta en materia fecal

HEMOPARASITOLOGÍA

• Concentración de Knott
• Frotis fino, Test de
• Gota gruesa , Test de
• Micro Strout (Buffy Coat)
• Strout, Prueba de

Area de Medio Interno-Sector de Guardia de Laboratorio

Gases en sangre

Determinación de Sodio, Potasio, Cloro, Calcio iónico, Magnesio iónico en sangre-orina.

Glucosa-Lactato.

Cooximetría.

Química Clínica-Hemostasia-Hematología. Marcadores Cardíacos. Líquidos de punción. Determinaciones de urgencia.

Aparatología: BT 3000 ( WIENER lab)

AXSYM PLUS ( ABBOTT lab)

COAGULOMETRO (WMArgentina)

Analizador Nova Biomedical modelos Stat Profile CCX y Stat Profile pHOx ( S.I.P.L.A)

Analizador de Iones RAPIDCHEM (SIEMENS)

Contador hematológico MICROS 60 ( WMArgentina)

MiniVidas (Bomerieux)

2. Decreto 3280/90: establece los requisitos para obtener la habilitación.

3. Colegio de Bioquímicos de la Provincia de Buenos Aires: tiene incumbencia en la habilitación del laboratorio y en el ejercicio de la profesión.

Dado que las distintas universidades de nuestro país otorgan diferentes títulos se debe tener en cuenta la ley 8271 donde agrupa a los profesionales bajo la denominación común de “bioquímico/a”

Ley 8271: Texto actualizado con las modificaciones introducidas por los Decretos-Leyes 9384/79 y 9947/83 y Leyes 11925 y 13560. Ejercicio profesional de la bioquímica en la Provincia de Buenos Aires. Art. 8 establece lo siguiente:

ARTICULO 8.- (Texto según Ley 11925) A los efectos que determina el artículo 1° de la presente Ley, se considerará “BIOQUÍMICO” al profesional universitario cuyo diploma consignare, en singular o plural, las palabras “BIOQUÍMICO” o “BIOQUÍMICA”, aunque éstas llevaren algunas otras precedentes y/o siguientes y/o cualquier aditamento. Dicho diploma deberá estar expedido o revalidado por Universidad Nacional o por Universidad Privada legalmente autorizada a ese fin.

Por ejemplo: la Facultad de Ciencias Exactas de la U.N.L.P otorga el título “Licenciado en Ciencias Bioquímicas”,  el cual posee la palabra bioquímica en plural y los egresados de esa institución por consiguiente son BIOQUÍMICOS.

4. Ley 13560: modifica la Ley 8271: ampliación de los alcances de la profesión bioquímica.

5. Código de ética profesional: publicado en la página web del Colegio de Bioquímicos de la Provincia de Buenos Aires www.colebioqpba.org.ar

Artículo 25°.- No obstante lo establecido en los dos artículos precedentes, en su relación personal y epistolar el trato entre todos los matriculados y respecto de terceros, será el de “doctor”.

6. Demás leyes y decretos reglamentarios: www.colebioqpba.org.ar

Acreditación de laboratorios de análisis clínicos:

• PAL : programa de acreditación de laboratorios de la Fundación Bioquímica Argentina, con invitación del director del programa a participar en el estudio de la norma ISO 15189:2003 “Medical laboratories - Particular requirements for quality and competence” (Laboratorios clínicos. Requisitos particulares para la calidad y competencia).

Certificación:

• NORMAS ISO 9000:2005

• NORMAS ISO 9001:2008

• NORMAS ISO 9004:2000

La norma ISO 15189 está específicamente dirigida a la acreditación de diferentes tipos de laboratorios clínicos. La ISO 15189 es también apropiada para las fases preanalítica y postanalítica. El conjunto del texto incluye dos apartados importantes: sobre el sistema de gestión de la calidad, equivalente a los requisitos para la certificación, y sobre los requisitos técnicos adicionales necesarios para la acreditación. Los anexos sobre la protección del sistema de información del laboratorio y la ética, proporcionan una información muy útil. Cualquier laboratorio que busque el reconocimiento de su competencia por vía de la acreditación, encontrará muy útil esta norma internacional. El proceso supondrá un trabajo considerable sobre el sistema de gestión, rutinas, documentación y procedimientos. El proceso también requerirá que el personal esté motivado y apoye el sistema de gestión.

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